מדריך טכני לאיסוף דגימות ובדיקות חדשות של וירוס קורונה

דרישות בסיסיות לאיסוף דגימות

1. דגימות המקרים המאושפזים נאספות על ידי הצוות הרפואי של בית החולים בו הם נמצאים, ודגימות אנשי הקשר הקרובים נאספות על ידי הסוכנות המקומית המיועדת לבקרת מחלות והמוסד הרפואי. בעת איסוף דגימות, יש להגדיר אזורי דגימה שונים בהתאם לחפצי איסוף שונים. חולי חום מגיעים למרפאות חום לצורך טיפול ודגימה. מוסדות שאין להם מרפאות חום צריכים להקים אזורי דגימה מיוחדים לחולי חום, ולדגום חולי חום וקבוצות בדיקה אחרות כדי להימנע מצמת. הַדבָּקָה. 2. אנשים נגועים אסימפטומטיים, אנשי כניסה ואנשי קשר קרובים צריכים לאסוף משטחי אף לוע לבדיקת חומצות גרעין במהלך בידוד ותצפית. יש לאסוף שתי דגימות של ספוגית אף-לוע בו-זמנית כאשר הבידוד משתחרר, ויש להשתמש בגיבים שונים לזיהוי חומצות גרעין לבדיקה בהתאמה. באופן עקרוני, הבדיקה המשנית מתבצעת על ידי מוסדות בדיקה שונים. 3. בהתאם לצרכי הבדיקות הקליניות והמעבדתיות, ניתן לקחת דגימות מרובות במהלך האשפוז והבידוד, וניתן לאסוף דגימות מרובות כגון דרכי נשימה, דם וצואה במקביל. צוות הדגימה צריך לעקוב בקפדנות אחר מפרטי הדגימה כדי לאסוף דגימות כדי להבטיח שהאיכות של הדגימות שנאספו עומדת בדרישות. במקביל, עליהם לרשום את המידע של הנבחן בפירוט, ויכולים להשתמש בסריקת ברקוד ובשיטות מידע אחרות כדי לאסוף מידע רלוונטי. 4. לצורך בדיקת אוכלוסיה, יש לקבוע צינורות דגימה בהתאם לדרישות הריאגנטים המשמשים למיצוי וגילוי חומצות גרעין, וניתן לבחור צינורות דגימה המכילים חומרים משביתי וירוסים (מלחי גואנידין או חומרים פעילי שטח וכו'). יש להניח את הדגימה המשמשת לבידוד וירוסים בצינור דגימה שאינו מכיל חומר לנטרול וירוסים. 5. פריטים וניטור סביבתי צריכים להתבסס על מטרות ניטור וצרכי ​​מניעה ובקרה כדי לקבוע את פריטי הדגימה, המיקום והכמות, הדגימה צריכה לפעול בהתאם למפרטי הדגימה.

(4) סוגי דגימות שנאספו. כל מקרה חייב לאסוף דגימות של דרכי נשימה חריפות (כולל דגימות של דרכי נשימה עליונות או דגימות של דרכי נשימה תחתונות). במקרים חמורים, יש לאסוף תחילה דגימות של דרכי הנשימה התחתונה; ניתן לאסוף דגימות צואה, דגימות דם מלא, דגימות סרום ודגימות צואה בהתאם לצרכים הקליניים. דגימת שתן. פריטים ודגימות סביבתיות נאספים בהתאם לדרישות הניטור.

סוגי דגימות: 1. דגימות דרכי נשימה עליונות: כולל משטחי אף-לוע, משטחי גרון וכו'. 2. דגימות דרכי נשימה תחתונות: כיח שיעול עמוק, נוזל שטיפה מכתשית, נוזל שטיפת סימפונות, שאיבת דרכי נשימה וכו'. 3. דגימות צואה/אנאל ספוגיות: יש לאסוף כ-10 גרם (בגודל של בוטנים). אם לא נוח לשמור את דגימות הצואה, ניתן לאסוף ספוגיות אנאליות. 4. דגימת דם: דם נוגד קרישה, נפח האיסוף 5 מ"ל, מומלץ להשתמש בכלי דם ואקום המכיל נוגד קרישה EDTA לאיסוף דם. 5. דגימות נסיוב: נסה לאסוף דגימות נסיוב כפולות בשלב החריף וההחלמה. יש לאסוף את הסרום הראשון בהקדם האפשרי (רצוי תוך 7 ימים לאחר הופעת המחלה), ואת הסרום השני יש לאסוף ב-3 עד 4 שבועות לאחר הופעת המחלה. נפח האיסוף הוא 5 מ"ל, ומומלץ להשתמש בצינור איסוף דם ואקום ללא נוגדי קרישה. דגימות סרום משמשות בעיקר לקביעת נוגדנים, וללא זיהוי חומצות גרעין. 6. דגימת שתן: אסוף את השתן של אמצע הבוקר, נפח האיסוף הוא 2~3ml. 7. דגימות משטח: לרבות מזון מיובא בשרשרת קרה או סחורה מיובאת על משטחי האריזה הפנימיים והחיצוניים, וכן כלי הובלה ואחסון וחלקים אחרים העלולים להיות מזוהמים באיסוף מריחות. 8. דגימות ביוב: על פי חלוקת מערכת הניקוז של אתרי עיבוד וטיפול סחורות קפואות בקנה מידה גדול בנמל הימי, התמקדות בבחירת מוצא הביוב, איסוף רשת הצנרת הפנימית, במורד הזרם של הביוב או חיבור עם רשת הצינורות העירונית וכו'. 2 עד 3 נקודות נדגמים סיביות.

(4) איסוף ועיבוד דגימות

1. ספוגית אף: הדגימה תומך בעדינות את ראשו של האדם הנאסף ביד אחת, ומחזיק את הספוגית ביד השנייה. הספוגית נכנסת לנחיר ומגיעה עמוק לאורך החלק התחתון של מעבר האף התחתון באיטיות. מכיוון שמעבר האף מעוקל, זה לא מקובל. כוח מופרז כדי למנוע דימום טראומטי. כאשר קצה הספוגית מגיע לדופן האחורית של חלל האף-לוע, סובב אותו בעדינות למשך שבוע (במקרה של שיעול רפלקסי, הישאר זמן מה), ואז הוצא לאט את הספוגית, והטבל את ראש הספוגית ב-2 ~ 3 מ"ל. תמיסת שימור וירוסים (ניתן גם להשתמש בתמיסת מלח איזוטונית, נוזל תרבית רקמה או חיץ פוספט), השלך את הזנב והברג את המכסה בחוזקה.

2. ספוגית לוע: על הנאסף לשטוף את הפה במי מלח רגיל, והאדם המדגום ירטיב את הספוגית בתמיסת מלח סטרילית (אסור להכניס את הספוגית לתמיסת שימור הנגיף כדי למנוע אנטיביוטיקה הגורמת לאלרגיות), וכן אדם שנאסף הישען מעט את הראש, פתח את הפה ועשה"ah" צליל, חשיפת השקדים משני הצדדים, הניחו את הספוגית על בסיס הלשון, נגבו את השקדים משני צידי האדם בכוח קטן לפחות 3 פעמים, ולאחר מכן נגבו למעלה ולמטה את הלוע האחורי למשך לפחות 3 פעמים. לאחר מכן, טבלו את ראש הספוגית בשפופרת המכילה 2 עד 3 מ"ל תמיסת שימור וירוסים (ניתן להשתמש גם בתמיסת מלח איזוטונית, נוזל תרבית רקמה או תמיסת חיץ פוספט), השליכו את הזנב והברגו את מכסה הצינור בחוזקה. ניתן להניח את משטח הגרון באותה צינורית כמו משטח האף-לוע.

3. תמצית אף או תמצית דרכי נשימה: השתמשו בקולט המחובר למשאבת לחץ שלילי כדי לחלץ ריר מהאף או לחלץ הפרשות דרכי הנשימה מקנה הנשימה. הכנס את ראש הקולט לחלל האף או קנה הנשימה, הפעל את הלחץ השלילי, סובב את ראש הקולט ולאט לאט, אסוף את הריר שחולץ, ושטוף את הקולט פעם אחת עם נוזל דגימה של 3 מ"ל (ניתן גם להשתמש ברופא ילדים קטטר מחובר למזרק 50 מ"ל אספן אלטרנטיבי).

4. כיח שיעול עמוק: לאחר שהמטופל סובל משיעול עמוק, אספו את הליחה שהשתעלו בצינורית דגימה המכילה 3 מ"ל של נוזל דגימה. אם כיח לא נאסף בנוזל הדגימה, ניתן להוסיף 2 עד 3 מ"ל של נוזל הדגימה לפני הבדיקה, או להוסיף נפח שווה של מיץ עיכול ליחה. הנוסחה של תמיסת אחסון מיץ עיכול כיח מוצגת בטבלה 1.

בעת השימוש, יש לדלל את תמיסת האחסון ל-50 מ"ל עם מים מופחתים, לערבב אותה עם אותו נפח של כיח, או לעיין בהוראות השימוש של מגיב, או להשתמש בנפח שווה של ליחה עם חיץ פוספט המכיל 1g/L proteinase K כדי להמיר את הליחה .

5. נוזל שטיפת סימפונות: הכנס את ראש האספן מהנחיר או משקע קנה הנשימה לקנה הנשימה (בעומק של כ-30 ס"מ), הזרקת 5 מ"ל של תמיסת מלח רגילה, הפעל את הלחץ השלילי, סובב את ראש האספן וסיג באיטיות, אספו את הריר שחולץ, ושטוף את הקולט בתמיסת הדגימה פעם אחת, או שאתה יכול להשתמש בצנתר ילדים המחובר למזרק של 50 מ"ל כדי להחליף את האוסף.

6. נוזל שטיפה מכתשית: לאחר הרדמה מקומית, הכנס את הברונכוסקופ הסיבאופטי דרך הפה או האף דרך הלוע לתוך הסימפונות של האונה התיכונה הימנית או מקטע הלשוני השמאלי של הריאה, והקש את החלק העליון שלו לתוך פתח ענף הסימפונות, והוסיפו לאט לאט. דרך חור הביופסיה של קנה הנשימה. מי מלח פיזיולוגי חיידקי, 30-50 מ"ל בכל פעם, סה"כ 100-250 מ"ל, לא יעלה על 300 מ"ל.

7. דגימת צואה: קח 1 מ"ל של תמיסת עיבוד דגימה, הרם את דגימת הצואה בגודל פולי סויה והוסף אותה לצינור, נשוף בעדינות ומוצץ 3 עד 5 פעמים, הניחו לה לעמוד בטמפרטורת החדר למשך 10 דקות, צנטריפוגה ב-8000 סל"ד למשך 5 דקות, וספוג את הסופרנטנט. איתור. ניתן להכין את תמיסת הטיפול בדגימת הצואה בעצמה, והנוסחה מוצגת בטבלה 2.

תמיסת HANK'S או תמיסת מלח איזוטונית אחרת, נוזל תרבית רקמה או תמיסת חיץ פוספט יכולה לשמש גם כדי להמיס את דגימת הצואה להכנת תרחיף צואה. אם למטופל יש תסמינים של שלשול, קח 3 ~ 5 מ"ל של דגימת צואה, פיפטט בעדינות כדי לערבב, צנטריפוגה ב-8000 סל"ד למשך 5 דקות, וספוג את הסופרנטנט לשימוש.

8. ספוגית אנאלית: השתמשו במקלון צמר גפן סטרילי כדי להחדיר אותו בעדינות לפי הטבעת 3-5 ס"מ, ולאחר מכן סובבו אותו בעדינות החוצה, הכניסו אותו מיד לתוך צינור דגימה של מכסה בורג חיצוני של 15 מ"ל המכילה תמיסת שימור וירוסים, השליכו את הזנב, ולסובב אותו. הדקו את מכסה הצינור.

9. דגימות דם: מומלץ להשתמש בצינורות לאיסוף דם ואקום המכילים נוגד קרישה EDTA לאיסוף דגימות דם של 5 מ"ל. בהתאם לסוג הריאגנטים לחילוץ חומצות גרעין שנבחרו, השתמש בדם מלא או בפלזמה למיצוי חומצת גרעין. כדי להפריד פלזמה, צנטריפוגה את הדם המלא ב-1500-2000 סל"ד למשך 10 דקות, ואסוף את הסופרנטנט בצינור פלסטיק סטרילי עם בורג העליון.

10. דגימת סרום: אספו 5 מ"ל של דגימת דם עם צינור איסוף דם בלחץ שלילי בוואקום, השאירו אותה בטמפרטורת החדר למשך 30 דקות, צנטריפוגה ב-1500-2000 סל"ד למשך 10 דקות, ואספו סרום בשפופרת פלסטיק עם בורג סטרילי.

11. דגימות פני השטח: עיין בשיטה המומלצת בסעיף"מפרט טכני לניטור סביבתי של נגיף הקורונה החדש בשוק הסחר החקלאי (סחר שוק)" (WS/T776—2021). לאחר שחדירת ספוגית הדגימה במלואה עם תמיסת שימור הנגיף, יש למרוח אותה שוב על פני השטח ולאחר מכן למרוח את הספוגית. החזירו אותו לצינור הדגימה והשרו אותו, הוציאו אותו ומרחו את הדגימה שוב, חזרו על הפעולה יותר מ-3 פעמים. דגימה מבוזרת מרובת נקודות מתבצעת על עצמים בעלי משטחים גדולים.

12. דגימות ביוב: עיין בשיטות המומלצות בסעיף"מפרט טכני לניטור סביבתי של נגיף קורונה חדש בשוק הסחר החקלאי (סחר שוק)" (WS/T776—2021). בעת איסוף דגימת ספוגית של שפכים, יש לטבול את הספוגית בביוב הספוג ולהוציא את הספוגית. החזירו את צינור הדגימה לטבילה, הוציאו אותו והטבלו אותו שוב בביוב, חזרו על זה יותר מ-3 פעמים, וערכו דגימה מרובת נקודות עבור כל מיקום דגימת ביוב. בעת איסוף דגימות מי ביוב, השתמש בבקבוקי פלסטיק מפוליאתילן כדי לאסוף 1L ~ 1.5L של ביוב. לאיסוף שפכים גדול מ-1.5 ליטר, ניתן להשתמש בדליי פלסטיק מפוליאתילן או בציוד העשרה מיוחד לדגימות מים באתר. לפני איסוף דגימות מי ביוב, יש לערבב אותן היטב ולאחר מכן לדגום אותן; אם קשה לערבב היטב את הביוב ומתרחשת ריבוד, ניתן לבצע דגימה בשכבות לפי הפרופורציה של נפח המים של כל שכבה.

13. חומרים נוספים: איסוף לפי דרישות ומפרטי עיצוב.

(5) אריזת דגימות

לאחר איסוף הדגימות, הן נארזות משנה בארון הבטיחות הביולוגי של מעבדת הבטיחות הביולוגית ברמה השנייה.

1. יש להניח את כל הדגימות בשפופרת איסוף דגימות בגודל מתאים ובתוכה מכסה הברגה ואטם, עמיד בפני הקפאה, ולהדק. מספר הדגימה, הסוג, השם ותאריך הדגימה מצוינים בחלק החיצוני של המיכל. 2. הכניסו את הדגימות האטומות לשקית אטומה, כל שקית מוגבלת לדגימה אחת. דרישות האריזה לדוגמה חייבות לעמוד בסטנדרטים המתאימים של"כללים טכניים להובלה בטוחה של סחורות מסוכנות באוויר". 3. כאשר מדובר בהובלת דגימות חיצוניות, תבוצע אריזה תלת-שכבתית לפי סוג הדגימות והחומרים המדבקים מסוג A או Class B.

(6) שימור דגימות

יש לבדוק דגימות המשמשות לבידוד וירוסים ולזיהוי חומצות גרעין בהקדם האפשרי. ניתן לאחסן דגימות שניתן לבדוק תוך 24 שעות ב-4°C; יש לאחסן דגימות שלא ניתן לזהות תוך 24 שעות ב-70 מעלות צלזיוס ומטה (אם לא- יש לאחסן ב-70 מעלות צלזיוס במקרר ב-20 מעלות צלזיוס). ניתן לאחסן דגימות סרום ב-4°C למשך 3 ימים, וניתן לאחסן אותן לאורך זמן מתחת ל-20°C. יש להגדיר ספריות מיוחדות או מונים מיוחדים לאחסון דגימות בנפרד.

(7) הגישו דגימות לבדיקה

יש לשלוח את הדגימות למעבדה בהקדם האפשרי לאחר האיסוף, ואין להניח את הדגימות בטמפרטורת החדר (25 מעלות צלזיוס) יותר מ-4 שעות לאחר האיסוף. אם נדרשת הובלה למרחקים ארוכים, מומלץ להשתמש בקרח יבש ובשיטות קירור אחרות לאחסון. הימנע מהקפאה והפשרה חוזרים ונשנים במהלך הובלת הדגימה.

1. שלח דגימות

כל המקרים המקוריים או המוקדמים במגיפות המקומיות שהתגלו במחוזות שונים (אזורים אוטונומיים ועיריות), מקרים מרכזיים הקשורים לאפידמיולוגיה של המקרים המוקדמים, מקרים מקומיים עם מקורות זיהום לא ידועים, מקרים מיובאים מחו"ל, סחורות מיובאות וסביבה קשורה דגימות חיוביות וכו'. יש לאסוף לפחות 2 דגימות במקביל, אחת נשלחת לכל סוכנות לבקרת מחלות מחוזית לבדיקה, השנייה נשלחת למרכזי סין לבקרת מחלות ומניעתן לבדיקה ובדיקה, וטופס הגשת דוגמה מצורף (ראה נספח 10-1). זנים מייצגים חדשים המבודדים ממחוזות שונים צריכים להישלח מיידית למרכזי סין לבקרת ומניעת מחלות לבדיקה ושימור.

2. הובלת דגימות וזנים

(1) הובלה מקומית של זני קורונה חדשים או חומרים ביולוגיים אחרים שעלולים להדבק מסווגת כ-Class A, ומספר האו"ם המתאים הוא UN2814. האריזה תואמת את הסיווג PI620 של מסמך ICAO Doc9284" הוראות טכניות להובלה בטוחה של סחורות מסוכנות באוויר" דרישות אריזה: הדגימות הסביבתיות שייכות לקטגוריה B, ומספר האו"ם המתאים הוא UN3373. האריזה עומדת בדרישות הסיווג PI650 של מסמך ICAO Doc9284" כללים טכניים להובלה בטוחה של סחורות מסוכנות באוויר"; ניתן להתייחס לאריזה הסטנדרטית לעיל להובלה באמצעי תחבורה אחרים. ההובלה של זני נגיף קורונה חדשים או חומרים אחרים שעלולים להדבק צריך להתבצע בהתאם ל-& quot;תקנות מנהליות בנושא הובלת מינים או דגימות של מיקרואורגניזמים פתוגניים מאוד (וירוסים) שיכולים להדביק בני אדם" (לשעבר צו משרד הבריאות מס' 45) עבור"תעודת אישור הובלה" .

(2) הובלה בינלאומית הדגימות או הזנים של נגיף הקורונה החדש המועברים בינלאומית ייארזו באופן סטנדרטי, יעברו את הנהלים הרלוונטיים בהתאם לסעיף" תקנות מינהל הסניטריים וההסגר של הכניסה ו צא מאמרים מיוחדים", ועמוד בדרישות לאומיות ובינלאומיות רלוונטיות.

(3) קבלה וניהול של דגימות וזני וירוסים. דגימות המועברות באוויר מגיעות לשדה התעופה היעד ומועברות ברכבי הובלה מקצועיים ליחידה הקולטת. דגימות המועברות ביבשה מועברות בכלי רכב מקצועיים. המובילים והמקלטים יטפלו בדגימות שלט כפול לקבלתה. הדגימות והזנים של נגיף הקורונה החדש צריכים להיות מנוהלים על ידי אדם מסור, לרשום במדויק את המקור, הסוג, הכמות והמספר של רישום הדגימות והזנים, לנקוט באמצעים יעילים כדי להבטיח את בטיחות הזנים והדגימות, ולמנוע בקפדנות שימוש לרעה, שימוש זדוני, גניבה וגניבה. שוד, אובדן, דליפה ותקריות אחרות.

　　02

בדיקות מעבדה לנגיף הקורונה החדש