התהליך הבסיסי של זיהוי PCR של נגיף קורונה חדש
1. איסוף דגימות: איסוף סימולטני של דגימות דרכי הנשימה העליונות (כולל האף-לוע והלוע) ודרכי הנשימה התחתונה (כולל כיח, שאיבת קנה הנשימה או נוזל שטיפה ברונכואלוואולרית) לזיהוי nCoV באמצעות RT-PCR. היכן שדגימות דרכי הנשימה התחתונות זמינות בקלות: השתמש ב-PPE מתאים לאיסוף דגימות (שים לב לדגימות URT לאמצעי זהירות של טיפות וחשיפה ודגימות LRT לאמצעי זהירות מוטסים) בעת איסוף דגימות URT, השתמש בספוגיות דגימת וירוסים (פולי אסטר סטרילי או סרטון במקום כותנה) ואמצעי הובלת וירוסים. אין לקחת דגימות מהנחיריים או השקדים. עבור חולי חשד ל-nCoV, במיוחד דלקת ריאות או חולים קשים, דגימת URT בודדת לא יכולה לשלול את האבחנה, ומומלץ להגדיל את דגימות ה-URT וה-LRT.
2. מיצוי חומצת גרעין: מכשיר מיצוי חומצת גרעין או מיצוי חומצת גרעין ידני
1), אין צורך במכשירים, השתמש בחילוץ ידני
ציוד וחומרים מתכלים למעבדה הדרושים למיצוי חומצת גרעין ובידוד דגימות:
ארונות בטיחות ביולוגיים (פונקציות: הפרדת דגימות, אספקת כוח אדם, דגימות והגנת הסביבה),
צנטריפוגה קירור שולחן עבודה במהירות גבוהה (פונקציה: מהירות גדולה או שווה ל-12000RPM, ניתוח חומצות גרעין וכו'),
מקרר בטמפרטורה נמוכה (פונקציה: אחסון ריאגנטים),
אמבט מתכת, פיפטה (פונקציה: מינון מדויק),
שפופרות צנטריפוגות מעוקרות (פונקציה: הפרדת חומצות גרעין וכו'),
כפפות לטקס (פונקציה: נגד זיהום),
מים ללא אתנול מוחלט, איזופרפנול, DNase ו-RNase (מים לא מטופלים ב-DEPC).
3. מכשיר מיצוי חומצת גרעין אוטומטי: (מיצוי אוטומטי, ניתן לחלץ 32 דגימות פעם ב-26 דקות)
הצלחת המתאימה המותקנת מראש נטענה ומחלצת ישירות על המכונה:
4. זיהוי PCR כמותי של פלואורסצנטי:
ציוד וחומרים מתכלים נדרשים: ארון בטיחות ביולוגי (פונקציה: הכנת דגימות, אספקת כוח אדם, דגימות והגנת הסביבה),
מכשיר PCR כמותי פלואורסצנטי (פונקציה: זיהוי וניתוח הגברה של PCR),
צנטריפוגה קירור במהירות גבוהה שולחנית (פונקציה: מהירות גדולה או שווה ל-12000RPM),
מקפיא בטמפרטורה נמוכה (אחסון דגימות ב--86 מעלות, אחסון ריאגנטים ב--20 מעלות ו-4 מעלות),
מתנד, (מיקס)
טיפים לפיפטה מדורגים (פונקציה: טעינה מדויקת), 1-10ul Size
שפופרות צנטריפוגות מעוקרות (0.5/1.5/2ml),
0.2ml צינור/צלחת PCR בדרגה אופטית (פונקציה: שפופרת תגובה PCR),
כפפות לטקס (פונקציה: נגד זיהום).
מיצוי חומצת גרעין, תצורת מערכת התגובה ופרשנות התוצאות כפופים להוראות הערכה.
