מצע התרבות התא חייב להכיל מספיק חומרים מזינים כדי לעמוד בחומרים ובאנרגיה הדרושים לתגובות ביוכימיות כגון סינתזת תאים חדשים ומטבוליזם של תאים. המרכיבים העיקריים של מדיום תרבית תאים הם מים, חומצות אמינו, ויטמינים, פחמימות, מלחים אנאורגניים וחומרי עזר אחרים. לכן, עלינו לשים לב לשיטת העיקור של מדיום תרבית תאים ולאמצעי זהירות נלווים בניסויים יומיים.
תרבית תאים
1. שיטות עיקור ואמצעי זהירות עבור אמצעי תרבית תאים שונים
שיטות עיקור של מדיום תרבית תאים מחולקות לעיקור חיטוי ועיקור סינון ממברנה. לאמצעי תרבות שונים עשויים להיות שיטות עיקור שונות בשל חומרי הזנה השונים שלהם.
חיטוי
חומרי הדפסה מסוימים, כגון MEM, ניתנים לביצוע חיטוי, מדיה אלה בדרך כלל אינם מכילים L-גלוטמין ונתרן ביקרבונט, ובדרך כלל מוסיפים לאחר שהמדיה עברה חיטוי. בנוסף, ניתן להשתמש בגלוטמט בלחץ גבוה (כגון L-alanyl-L-glutamine) במקום L-glutamine. המדיום הניתן לחיטוי עובר עיקור מלא עם אובדן מינימלי של חומרים מזינים ב-121 מעלות, 15 psi ו-15 דקות, מבלי להאריך את זמן העיקור.
רוב אמצעי התרבות התאים אינם מתאימים לביצוע חיטוי. מכיוון שמצע התרבות מכיל לרוב ויטמינים, חלבונים, פוליפפטידים, גורמי גדילה וחומרים אחרים, חומרים אלו מועדים לדנטורציה או לאובדן תפקוד בחשיפה לטמפרטורה גבוהה או לקרינה, ולכן הנוזלים הנ"ל עוברים בעיקר סינון ומעוקר להסרת חיידקים. קיימות ממברנות פילטר רבות לסינון ועיקור, והחומרים שלהן הם בעיקר PES, ניילון, פוליקרבונט, אצטט תאית, ניטרוצלולוזה, PTFE, קרמיקה וכו'. עיקור סינון ממברנה היא שיטה נפוצה ונוחה כיום. לעתים קרובות נעשה שימוש בממברנות סינון עם 0.2 מיקרומטר בגודל נקבוביות, ויש כאלה שמשתמשים ב-0.1 מיקרומטר בגודל נקבוביות. בהשוואה לסינון בלחץ גבוה, לממברנות יש תוחלת חיים והן יקרות יותר, אך הן פחות הרסניות לחומרי הזנה במצע התרבות התא.
2. אמצעי זהירות במהלך אחסון מדיות תרבית תאים שונות
בדרך כלל, אין להקפיא את המדיום לתרבית תאים נוזלי ב--20 מעלות, מכיוון שחומרי הזנה עלולים להיווצר במהלך ההפשרה, מה שישפיע על אפקט התרבית. בנסיבות רגילות, יש לאחסן אותו ב-2 ~ 8 מעלות הרחק מאור. לפני השימוש, הוציאו אותו מהמקרר והניחו אותו בטמפרטורת החדר לצורך איזון. המדיום הנוזלי הרגיל תקף למשך 6 עד 12 חודשים. נסו להימנע מאחסון לטווח ארוך של מדיום תרבית תאים נוזלי. הגלוטמין שבו יתפרק לאט עם הארכת זמן האחסון. אם צמיחת התאים אינה טובה, ניתן לשקול בדיקת תכולת הגלוטמין במדיום כדי לקבוע אם להוסיף גלוטמין. . למדיום תרבית תאים נוזלי זמין מסחרית יש תאריך תפוגה ספציפי. לאחר שימוש במדיום תרבית תאי אבקה יבש להכנת נוזל, יש לאחסן אותו גם בטמפרטורה נמוכה (2 ~ 8 מעלות). בנוסף לפירוק הקל של גלוטמין במדיום, רכיבים אחרים במדיום עשויים גם להתפרק או לשקוע עם עליית הטמפרטורה.