עיצוב תאים כולל את השלבים של הזרקת תאים, עיצוב והשגה. התאים בבקבוק תרבית התאים חייבים לגדול ולהתפתח במידה מסוימת. ברגע זה, יש צורך להסתמך על טריפסין כדי לעכל את התאים בדופן החיצונית של הבקבוק ואז להרגיש אותו. במקרה של אנזימים, יש לשלוט על זמן העיכול.
בקבוק תרבית תאים T75
טריפסין שייך לסוג אחר של טריפסין, אשר יכול לפרק חלבונים על ממברנות תאים שהתמזגו לצלוחיות תרבית תאים. על ידי המסת החלבון על החלק המקביל, החלבון במפגש בין החלבונים מומס, והתא הופך לכדורי בשל כוח התמיכה של מסגרת התא של המבנה הפנימי שלו, ובכך מפריד בין התאים. רמת עיכול הטריפסין היא גורם מפתח בעיצוב התאים: עיכול מוגזם מגביר את פסולת התא, פסולת שחורה גדלה, תאים ייפלו כמכלול, יסכנו מאוד את קיימות התא, וחלק מהתאים צפים, עם יציאת הטריפסין המושלכת; אם העיכול לא מספיק, קשה לפוצץ את התאים מהדופן הפנימית של הבקבוק, וגם הנשיפה וההכאה המתמשכת יפגעו בפעילות התא.
בקבוק תרבית תאים
בקבוק תמיסת תרבית חלבון בסרום
במוסדות או תאים שונים, ההשפעה של אנזימי הלבלב אינה זהה. הפעילות של התאים המפוזרים באנזים הלבלב קשורה גם לערך הריכוז שלו, לטמפרטורה ולמשך ההשפעה שלו. כאשר ה-pH הוא 8.0 והטמפרטורה היא 37, רמת היעילות של התמיסה המימית של אנזים הלבלב חזקה יחסית. בעת מריחת טריפסין, יש לשלוט היטב על הריכוז, הטמפרטורה ומשך הזמן כדי למנוע נזק לתאים הנגרם על ידי עיכול מוגזם. מכיוון ש-Ca2, Mg2 וחלבון בסרום, גרמי חלבון מפחיתים את פעילות הלבלב, לכן בעת הכנת תמיסה מימית של פנקריאטין יש להשתמש ב-BSS ללא Ca2, Mg2, כגון: תמיסת D-Hanks. בעת הפסקת העיכול, ניתן להפסיק את הטריפסין עם מצע תרבית תאי חלבון בסרום או מעכב טריפסין כדי לעצור את השפעת הטריפסין על התאים.
בקבוק תרבות
בקבוק תרבית תאים T25
בנוסף, אם זה תא שנרכש לאחרונה, אתה יכול להשתמש בריכוז נמוך יותר של טריפסין כדי לחקור את זמן העיכול תחילה, ולבחון אם התאים הופכים עגולים בכל דקה, ולעשות תיעוד טוב. בסך הכל, כאשר משיגים את התאים בבקבוק תרבית התאים, יש צורך לשלוט בזמן הטריפסיניזציה, כדי לשמור ביעילות על כדאיות התאים.
